医疗器械生产企业要对洁净室(区)环境进行控制和监测，在YY 0033—2000《无菌医疗器具生产管理规范》附录C中规定了无菌医疗器具洁净室(区)环境要求及监测项目，我所承接无菌医疗器械生产环境的监测，监测的项 目有：温度、相对湿度、风速、换气次数、静压差、尘埃数、沉降菌数。其中温度、相对湿度、风速、换气次数、静压差依据的标准是JGJ 71—90《洁净室施工及验收规范》；尘埃数依据的标准是GB／T 16292—1996《医药工业洁净室 (区)悬浮粒子的测试方法》；沉降菌数依据的标准是GB／T 16294—1996《医药工业洁净室 (区)沉降菌的测试方法》。现将各项 目检测依据 的标准及注意事项综述如下，供生产企业参考。
洁净室(区)监测项目：
1温度 、相对湿度
1．1标准要求：各级别洁净室(区)均应符合温
度在l8℃一28℃，相对湿度在45％～65％范围内。
1．2使用仪器 ：温湿度计
1．3检测方法
1．3．1 室内空气温度和相对湿度测定之前，净化 空调系统应已连续运行至少24小时。对有恒温要 求的场所，根据对温度和相对湿度波动范围的要 求，测定宜连续进行8h～48 h，每次测定间隔不大
于30 min。(见JGJ 71—90《洁净室施工及验收规范》附 录六)。
1．3．2根据温度和相对湿度波动范围，应选择相应的具有足够精度的仪表进行测定。
1．4室内测点一般布置在以下各处
1．4．1送 、回风口处。
1．4．2恒温工作区内具有代表性的地点(如沿着 工艺设备周围布置或等距离布置)。
1．4．3室中心(没有恒温要求的系统，温、湿度 只测此_-一点)。
1．4．4敏感元件处
所有测点宜在同一高度，离地面0．8 m。也可 以根据恒温区的大小，分别布置在离地不同高度的几个平面上。测点距外墙表面应大于0．5m。文章来源：http://www.iwuchen.com
1．5测点数按表1确定
|
波动范围 |
室面积≤50m2 |
每增加2o m2～5o rn2 |
|
|
△t=±0.5-±2℃ |
5个 |
增加3个 5个 |
|
|
△RH =±5％一±10％ |
|
|
|
|
△t=±0.5℃ |
点间距不应大于2 m，点数不应少于5个 |
||
|
△RH≤±5％ |
|||
|
|
|
||
2换气次数
2．1标准要求(见表2)。
|
洁净度级别 |
风速(m／s)，换气次数(次／h) |
|
|
l00 |
水平层流：风速／>0.4 m／s 垂直层流：风速≥0.3 rn／s |
|
|
10000 |
换气次数(次／h) |
≥20 |
|
100 000 |
≥15 |
|
|
300000 |
≥12 |
|
见JGJ 71—90《洁净室施工及验收规范》附录
2．2使用仪器：热球式风速计、风量平衡测试仪。
2．3检测方法
2．3．1风量风速检测必须首先进行，净化空调各项效果必须是在设计的风量风速条件下获得。
2．3．2风量检测前必须检查风机运行是否正常，系统中各部件安装是否正确，有无障碍(如过滤器有无被堵、挡)，所有阀门应固定在一定的开启位置上，并且必须实际测量被测风口、风管尺寸。
2．3．3对于单向流(层流)洁净室，采用室截面平均风速和截面积乘积的方法确定送风量，其中垂直单向流(层流)洁净室的测定截面取距地面0．8 m的水平截面；水平单向流(层流)洁净室取距送风面0．5 m的垂直截面。截面上测点间距不应大于2 m，测点数应不少于10个，均匀布置。
2．3．4对于乱流洁净室，采用风口法或风管法确
定送风量。
2．3．5对于不安装过滤器的风口，可按现行国家
标准《通风与空调工程施工及验收规范》GBJ 243
附录一的方法执行。
2．3．6对于安有过滤器的风口，根据风口形式可选用辅助风管，即用硬质板材做成与风口内截面相同、长度等于2倍风口边长的直管段，连接于过滤器风口外部，在辅助风管出口平面上，按最少测点数不少于6点均匀布置测点，用热球风速仪测定各点风速。以风口截面平均风速乘以风口净截面积确定风量。
2．3．7对于安有同类扩散板的风口，可以根据扩散板的风量阻力曲线(出厂风量阻力曲线或现场实测风量阻力曲线)和实测扩散板阻力(孔板内静压与室内压力之差)，查出风量。测定时用微压计和细毕托管，或用细橡胶管代替毕托管，但都必须使测孔平面与气流方向平行。此外，也可以采用经专业检测部门认可的其他方法。
2．4结果计算
2．4．1风口的平均风速
V=V1+V2+V3+…+Vn/N
式中：v_一风口的平均风速，(m／s)；
V1，V2……VN一各测点的风速(m／s)；
N一测点总数(个)。
2．4．2换气次数(次／h)
换气次数= 3600×F×V×M/S×H
式中：F_风口面积(m2)；
v-一测得的风口平均风速(m／s)；
n广风口总数(个)；
S-_房间面积(m2)；
H-一房间高度(m)。
2．5结果评定：换气次数应达到各洁净室(区)相应的级别。
3静压差
3．1标准要求：相邻不同级别洁净室之间和洁净室与非洁净室之间的静压差应大于5 Pa；洁净室与室外静压差应大于10 Pa。
3．2使用仪器：数字式压差计。
3．3检测方法：静压差的测定应在所有的门关闭时进行，并应从平面上最里面的房间依次向外测定。见JGJ 71—9《洁净室施工及验收规范》标准的附录六，各级别洁净室(区)均应符合上述规定。
4尘埃数
见GB／T 16292—1996《医药工业洁净室(区)
4．1标准要求：采用计数浓度法，即通过测定洁
净环境内单位体积空气中含大于或等于某粒径的悬
浮粒子数，来评定洁净室(区)的悬浮粒子洁净度
等级。
表3各洁净度级别尘埃最大允许数
|
洁净度级别 |
尘埃最大允许数 ，个／m3 |
|
|
≥0.5微米 |
≥5微米 |
|
|
100 |
3500 |
0 |
|
10000 |
350000 |
2000 |
|
100000 |
3500000 |
20000 |
|
300000 |
10500000 |
≤60000 |
4．2使用仪器：激光尘埃粒子计数器。
4．3测试规则 ‘
4．3．1测试条件
1)温度和相对湿度：洁净室(区)的温度和
相对湿度应与其生产及工艺要求相适应。
2)压差：空气洁净度不同的洁净室(区)之
间的压差应≥4．9 Pa，空气洁净度级别要求高的洁
净室(区)对相邻的空气洁净度级别低的洁净室
(区)一般要求呈相对正压。
4．3．2测试状态：静态测试时，室内的测试人员
不得多于2人，测试报告中应标明测试时所采用的
状态。
4．3．3测试时间：对单向流，测试应在净化空气
调节系统正常运行时间不少于10 rain后开始，对非
单向流，测试应在净化空气调节系统正常运行时间
不少于30min后开始。
4．3．4悬浮粒子计数
1)采样点数目及其布置
(1)最少采样点数：悬浮粒子洁净度测试的最
少采样点数按表4确定。
表4最少采样点数目
|
面积 |
洁净度级别 |
||
|
100 |
10000 |
100000 |
|
|
<l0 |
2—3 |
2 |
2 |
|
≥10-＜20 |
4 |
2 |
2 |
|
≥20-＜40 |
8 |
2 |
2 |
|
≥40-＜100 |
16 |
4 |
2 |
|
≥100-＜200 |
40 |
10 |
3 |
|
≥200-＜400 |
80 |
20 |
6 |
|
≥400-＜1000 |
160 |
40 |
13 |
|
≥1000-＜2000 |
400 |
100 |
32 |
|
2000 |
800 |
200 |
63 |
注 ：表 中的 面积 ，对于单向流洁净 室，指 的是送风面积 ；对于非单
向流洁净室，指的是房间面积。
(2)采样点的位置：采样点一般在离地面0．8 m高度的水平面上均匀布置；采样点多于5点时， 也可以在离地面0．8 m一1．5 m高度的区域内分层布 置，但每层不少于5点。
2)采样点的限定：对任何小洁净室或局部空 气净化区域，采样点数目不得少于2个，总采样 次数不得少于5次。每个采样点的采样次数可以多 于1次 ，且不 同采样点的采样次数可以不同。
3)不同洁净度级别每次最小的采样量按表3的规定。
表5最小的采样量
|
洁净度级别 |
采样量，L/次 |
||
|
|
≥0.5微米 |
≥5微米 |
|
|
100 |
5.66 |
- |
|
|
10000 |
2.83 |
8.5 |
|
|
100000 |
2.83 |
8.5 |
|
4)采样注意事项：
(1)在确认洁净室(区)送风量和压差达到要 求后 ，方可进行采样。
(2)对于单向流，计数器采样管口朝向应正对 气流方向，对于非单向流，采样管口宜向上。
(3)布置采样点时，应避开回风口。
(4)采样时，测试人员应在采样口的下风侧。
4．4结果计算
4．4．1采样点的平均粒子浓度
A=C1+C2+… +CN/N
式 中： 卜 某 一 采 样点 的 平 均 粒 子 浓 度，粒(个)／立方米；
ci—某一采样点的粒子浓度(i-1，2，3，…，
N)，粒(个)／立方米；
N一某一采样点上的采样次数，次。
4．4．2平均值的均值
M=A1+A2+…+Al/L
式中：M-一平均值的均值，即洁净室(区)的平均粒子浓度，粒／立方米；
Ai一某一采样点的平均粒子浓度(i=1，2，
3，…，L)，粒／立方米；
L-某一洁净室(区)内的总采样点数，个。
4．4．3标准误差
SE=(A1-M)平方米+（A2-M）平方米+…+(Al-M)平方米/L(L-1)
式中：sE一平均值均值的标准误差，粒／立方米。
4．4．4置信上限
从正态分布抽样得到的实际均值按给定的置信度(此处为95％)计算得到的估计上限将大于此实际均值，则称计算得到的这一均值估计上限为置 信上限。
UCL=M +tX SE
式中：uCL一平均值均值的95％置信上限，粒(个)／m3；
t一95％置信上限的t分布系数，见下表6。
表6
|
采样点数L |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
＞9 |
|
t |
6.31 |
2.92 |
2.35 |
2.13 |
2.02 |
1.94 |
1.90 |
1.89 |
- |
4．5结果评定：判断悬浮粒子洁净度级别应依据以下两个条件：
4．5．1每个采样点的平均粒子浓度必须低于或等 于规定的级别界限，即Ai≤级别界限。
4．5．2全部采样点的粒子浓度平均值均值的95％ 置信上限必须低于或等于规定的级别界限，即UCL≤级别界限。
5室内沉降菌的检测(见GB／T 16294—1996《医药工业洁净室 (区)沉降菌的测试方法》)。
5．1标准要求：采用沉降法，用直径为90 mlTl营 养琼脂培养皿，在采样点上沉降30 min，即通过 自然沉降原理收集空气中盼生物粒子于培养基平皿， 经48小时，在30℃一35℃下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净 环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室(区)的洁净度(见表7)。
表7各洁净度级别沉降菌数限值
|
洁净度级别 |
沉降菌数 个/皿 |
|
100 |
≤1 |
|
10000 |
≤3 |
|
100000 |
≤10 |
|
300000 |
≤15 |
5．2使用仪器和设备：高压灭菌器，生化培养箱，培养皿，培养基 ，天平，洁净工作台。
5．3测试规则
5．3．1测试状态：静态测试时，室内的测试人员 不得多于2人，测试报告中应标明测试时所采用的状态。
5．3．2测试时间：对单向流，测试应在净化空气 调节系统正常运行时间不少于10 min后开始，对非单向流，测试应在净化空气调节系统正常运行时间 不少于30mill后开始 。
5．3．3最少采样点数：沉降法的最少采样点数按 表2确定(见表8)。
表8最少采样点数
|
面积┫ |
洁净度级别 |
||
|
100 |
10000 |
100000 |
|
|
<l0 |
2—3 |
2 |
2 |
|
≥10-＜20 |
4 |
2 |
2 |
|
≥20-＜40 |
8 |
2 |
2 |
|
≥40-＜100 |
16 |
4 |
2 |
|
≥100-＜200 |
40 |
10 |
3 |
|
≥200-＜400 |
80 |
20 |
6 |
|
≥400-＜1000 |
160 |
40 |
13 |
|
≥1000-＜2000 |
400 |
100 |
32 |
|
2000 |
800 |
200 |
63 |
注：表中的面积，对于单向流洁净室，指的是送风面积；对于非单
向流洁净室，指的是房间面积。在满足最少测定点数的同时，还宜满足最少培养皿数(见表9)。
表9最少培养血数
|
洁净度级别 |
所需直径90ilnll培养皿数(以沉降30min计) |
|
100 |
14 |
|
10000 |
2 |
|
100000 |
2 |
5．3．4采样点的布置：采样点的位置可以同悬浮 粒子测试点，工作区采样点的位置离地面0．8 m～1．5 m左右，可在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。
5．4结果计算：用计数方法得出各个培养皿的菌落数，求出平均菌落数。
5．5结果评定 ：用平均菌落数判断洁净室(区)空气中的微生物。洁净室(区)内的平均菌落数必 须低于所选定的评定标准，若某洁净室(区)内的 平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先进行 消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。 在环境的监测过程中，我们发现企业在换气次数自测中存在问题的较多，大部分企业未按标准方 法的要求制作辅助风管，有的企业虽制作了辅助风 管并将风速仪固定其中，但风速仪探头的位置不正 确，探头应垂直于气流方向。在尘埃数检测中应注意不仅全部采样点的粒子浓度平均值均值的95％ 置信上限必须≤规定的级别界限，每个采样点的平 均粒子浓度也必须≤规定的级别界限，在沉降菌检测中应注意在满足最少测定点数的同时，还应满足 最少培养皿数。
